目錄
第一章 基本實(shí)驗(yàn)操作及常用儀器使用 1
第一節(jié) 常用研究技術(shù) 1
第二節(jié) 基本實(shí)驗(yàn)操作 24
第三節(jié) 常用儀器使用 32
第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及安全防護(hù) 43
第五節(jié) 如何撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 44
第二章 經(jīng)典驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn) 46
第一節(jié) 蛋白質(zhì)定量分析實(shí)驗(yàn) 46
實(shí)驗(yàn)一 微量凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 46
實(shí)驗(yàn)二 雙縮脲法測(cè)定血清蛋白質(zhì)含量 49
實(shí)驗(yàn)三 Folin-酚試劑法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 50
實(shí)驗(yàn)四 紫外分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度 52
實(shí)驗(yàn)五 BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度 54
第二節(jié) 層析實(shí)驗(yàn) 56
實(shí)驗(yàn)六 紙層析法觀察轉(zhuǎn)氨基作用 56
實(shí)驗(yàn)七 葡聚糖凝膠柱層析分離血紅蛋白與魚(yú)精蛋白 58
實(shí)驗(yàn)八 離子交換層析分離混合氨基酸 60
實(shí)驗(yàn)九 薄層層析分離鑒定氨基酸 61
第三節(jié) 電泳實(shí)驗(yàn) 64
實(shí)驗(yàn)十 血清醋酸纖維薄膜電泳 64
實(shí)驗(yàn)十一 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清LDH同工酶 67
實(shí)驗(yàn)十二 SDS-PAGE測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量 72
第四節(jié) 酶學(xué)實(shí)驗(yàn) 74
實(shí)驗(yàn)十三 血清堿性磷酸酶活性測(cè)定 75
實(shí)驗(yàn)十四 血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性測(cè)定 77
實(shí)驗(yàn)十五 胰酶對(duì)蛋白質(zhì)的消化和影響酶作用的因素 79
實(shí)驗(yàn)十六 丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 82
實(shí)驗(yàn)十七 Hg2+對(duì)脲酶的抑制作用 84
實(shí)驗(yàn)十八 酶米氏常數(shù)的測(cè)定 86
第五節(jié) 糖與脂質(zhì) 87
實(shí)驗(yàn)十九 血糖濃度的測(cè)定 88
實(shí)驗(yàn)二十 腎上腺素對(duì)血糖濃度的影響 90
實(shí)驗(yàn)二十一 血清三酰甘油濃度測(cè)定 91
實(shí)驗(yàn)二十二 血清總膽固醇濃度測(cè)定 94
實(shí)驗(yàn)二十三 血清載脂蛋白apoA1的測(cè)定 98
實(shí)驗(yàn)二十四 血清過(guò)氧化脂質(zhì)的測(cè)定 99
實(shí)驗(yàn)二十五 血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳 101
第六節(jié) 核酸分離純化技術(shù) 102
實(shí)驗(yàn)二十六 基因組DNA的提取制備與檢測(cè) 102
實(shí)驗(yàn)二十七 全血基因組DNA的試劑盒法提取制備與檢測(cè) 106
實(shí)驗(yàn)二十八 總RNA的提取制備與檢測(cè) 108
實(shí)驗(yàn)二十九 質(zhì)粒DNA的提取制備與檢測(cè) 111
實(shí)驗(yàn)三十 動(dòng)物組織核酸的提取及成分鑒定 115
第七節(jié) PCR技術(shù) 117
實(shí)驗(yàn)三十一 常規(guī)PCR技術(shù) 117
實(shí)驗(yàn)三十二 定量PCR技術(shù) 120
第八節(jié) 基因克隆技術(shù) 123
實(shí)驗(yàn)三十三 凝膠中DNA片斷的純化回收 123
實(shí)驗(yàn)三十四 DNA的限制性酶切與電泳 124
實(shí)驗(yàn)三十五 DNA連接實(shí)驗(yàn) 127
實(shí)驗(yàn)三十六 感受態(tài)細(xì)胞的制備 130
實(shí)驗(yàn)三十七 重組DNA轉(zhuǎn)化與藍(lán)白斑篩選 131
第九節(jié) 分子雜交與印跡技術(shù) 133
實(shí)驗(yàn)三十八 核酸原位雜交 133
實(shí)驗(yàn)三十九 Southern印跡雜交 139
實(shí)驗(yàn)四十 Northern印跡雜交 142
實(shí)驗(yàn)四十一 Western印跡 145
第十節(jié) 細(xì)胞結(jié)構(gòu) 147
實(shí)驗(yàn)四十二 動(dòng)植物細(xì)胞的基本形態(tài)與結(jié)構(gòu)及細(xì)胞顯微測(cè)量 147
實(shí)驗(yàn)四十三 細(xì)胞內(nèi)幾種細(xì)胞器的觀察 151
實(shí)驗(yàn)四十四 小白鼠巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn) 152
實(shí)驗(yàn)四十五 細(xì)胞內(nèi)幾種化學(xué)成分的顯示 153
實(shí)驗(yàn)四十六 細(xì)胞骨架系統(tǒng)的顯示與觀察 155
實(shí)驗(yàn)四十七 細(xì)胞膜的通透性的觀察 157
第十一節(jié) 細(xì)胞增殖 158
實(shí)驗(yàn)四十八 細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn) 158
實(shí)驗(yàn)四十九 細(xì)胞有絲分裂觀察 159
實(shí)驗(yàn)五十 細(xì)胞原代培養(yǎng) 161
實(shí)驗(yàn)五十一 細(xì)胞傳代培養(yǎng) 163
實(shí)驗(yàn)五十二 培養(yǎng)細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇與運(yùn)輸 163
第十二節(jié) 醫(yī)學(xué)遺傳 164
實(shí)驗(yàn)五十三 人類(lèi)某些遺傳性狀的觀察及皮膚紋理分析 165
實(shí)驗(yàn)五十四 人類(lèi)染色體照片核型分析 171
實(shí)驗(yàn)五十五 染色體G顯帶染色體的核型分析 173
實(shí)驗(yàn)五十六 人類(lèi)染色體鏡下核型分析 176
第三章 綜合性實(shí)驗(yàn) 178
實(shí)驗(yàn)一 血清γ-球蛋白的分離純化及鑒定 178
實(shí)驗(yàn)二 堿性磷酸酶的分離純化與動(dòng)力學(xué)研究 183
實(shí)驗(yàn)三 hCS基因在大腸埃希菌中的表達(dá)、純化及鑒定 187
實(shí)驗(yàn)四 hCS基因在畢赤酵母中的表達(dá)及鑒定 192
實(shí)驗(yàn)五 熒光原位雜交實(shí)驗(yàn) 195
實(shí)驗(yàn)六 用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)啟動(dòng)子活性 198
實(shí)驗(yàn)七 電泳遷移阻滯實(shí)驗(yàn) 201
實(shí)驗(yàn)八 染色質(zhì)免疫沉淀 205
實(shí)驗(yàn)九 蛋白質(zhì)雙向電泳 209
實(shí)驗(yàn)十 肝癌組織的代謝組學(xué)分析 214
實(shí)驗(yàn)十一 酵母雙雜交實(shí)驗(yàn) 218
實(shí)驗(yàn)十二 RNA干擾實(shí)驗(yàn) 220
實(shí)驗(yàn)十三 人類(lèi)外周血染色體標(biāo)本的制備觀察 224
實(shí)驗(yàn)十四 人類(lèi)惡性腫瘤染色體標(biāo)本的制備觀察 225
實(shí)驗(yàn)十五 羊水細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本的制備觀察 226
實(shí)驗(yàn)十六 人精子染色體標(biāo)本制備 228
實(shí)驗(yàn)十七 綠色熒光蛋白標(biāo)記的融合蛋白轉(zhuǎn)染及觀察 230
第四章 創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn) 231
實(shí)驗(yàn)一 重要蛋白質(zhì)或酶的分離純化 231
實(shí)驗(yàn)二 家族性高膽固醇血癥的診斷 231
實(shí)驗(yàn)三 血友病的分子診斷 233
實(shí)驗(yàn)四 RNA干擾技術(shù)靶向沉默目的基因 233
實(shí)驗(yàn)五 家系調(diào)查和遺傳病的系譜分析 234
實(shí)驗(yàn)六 藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的檢測(cè)實(shí)驗(yàn) 236
主要參考文獻(xiàn) 237