生物化學與分子生物學是從分子水平研究生命本質(zhì)的一門學科，是生命科學的前沿學科，掌握其基本理論及實驗已成為探討疾病的分子機制和防治方法，甚至認識生命現(xiàn)象的必要手段�！渡锘瘜W與分子生物學實驗教程》包括三章，第一章是實驗室規(guī)章制度和實驗記錄、實驗報告，第二章介紹了實驗室常用儀器設備、常用試劑及常用實驗技術(shù)，第三章為具體實驗內(nèi)容，分為基礎性實驗、融合性實驗和創(chuàng)新性實驗三大類：基礎性實驗注重培養(yǎng)學生基本的實驗操作能力，使其熟悉生物化學與分子生物學常見的實驗方法和手段；融合性實驗主要結(jié)合學科的不同特色，培養(yǎng)學生綜合分析和解決問題的能力；創(chuàng)新性實驗主要根據(jù)學科的新發(fā)展，啟發(fā)學生開拓思路，并提出解決問題的方案，重點培養(yǎng)學生的獨立思考和創(chuàng)新能力。
《生物化學與分子生物學實驗教程》適合醫(yī)學院校學生使用，也可作為生物化學與分子生物學相關(guān)研究人員的參考用書。
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高等院校教育改革如火如荼，尤其是對創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)能力的提升有了新的要求。實驗教學是創(chuàng)新型人才培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)。各個院校的實驗教學有各自的特點，目前普遍傾向于實驗課程獨立開課，逐步擺脫實驗課程完全依賴于理論教學的傳統(tǒng)模式。院校間的相互學習和交流也是非常必要的。在上述背景下，編者聯(lián)合了四川大學華西基礎醫(yī)學與法醫(yī)學院、西南醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院及昆明醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院的多位長期堅守在生物化學與分子生物學理論和實驗教學一線的老師（主要是年輕教師），共同編寫了本教材。
本教材在內(nèi)容編寫方面，除包括了原有的生物化學與分子生物學課程的主要基礎性實驗外，還設計了一些融合性實驗和創(chuàng)新性實驗，目的是讓學生通過實驗掌握較全面的實驗技能，同時能夠?qū)⒏鲗W科的知識貫通起來。此外，從多個角度分層次地展現(xiàn)教學內(nèi)容，使教學形式活潑生動，教學內(nèi)容形象直觀，學生容易理解相關(guān)知識，進而調(diào)動學生學習的積極性和主動性，激發(fā)學生的創(chuàng)造性思維。這是我們所做出的努力和嘗試，希望能取得一定的效果。編者的最終目的是把生物化學與分子生物學實驗教學工作做好，努力為培養(yǎng)適應社會發(fā)展需要的人才盡綿薄之力。
教材的編寫，實際上是給了編者一次機會，以吸取前人的精華.總結(jié)實驗教學中的經(jīng)驗教訓，改正不足。但由于編者水平有限，書中難免存在不足之處，懇請廣大讀者及同行學者提出寶貴意見，以便及時修正，不勝感激。
目錄
前言
第一章實驗室規(guī)章制度和實驗記錄、實驗報告1
一、實驗室規(guī)章制度1
二、實驗室安全及防護2
三、實驗記錄和實驗報告3
(一)實驗記錄3
(二)實驗報告3
四、生物化學與分子生物學實驗的繪圖要求、方法及實驗數(shù)據(jù)處理分析方法4
(一)實驗報告中的圖表4
(二)實驗數(shù)據(jù)的處理與分析6
第二章實驗室常用儀器設備、常用試劑及常用實驗技術(shù)9
一、實驗室常用玻璃儀器的介紹9
(一)常用玻璃儀器9
(二)常用玻璃儀器的洗滌10
二、常用試劑的配制、緩沖溶液與緩沖體系的介紹11
(一)常用試劑配制要點11
(二)實驗試劑的使用12
(三)溶液濃度12
(四)緩沖溶液12
三、離心技術(shù)14
(一)離心中常用概念14
(二)離心方法16
(三)離心機的構(gòu)造16
(四)離心機的分類17
(五)離心機使用注意事項17
四、分光光度技術(shù)17
(一)原理17
(二)分光光度計的基本結(jié)構(gòu)18
(三)分光光度計的應用18
(四)分光光度計的常用類型18
(五)分光光度計的使用19
五、層析技術(shù)20
(一)層析原理20
(二)層析分類22
(三)主要的層析技術(shù)24
六、電泳技術(shù)32
(一)電泳的基本原理32
(二)影響電泳的因素32
(三)電泳的分類33
(四)常用的電泳技術(shù)34
七、PCR技術(shù)37
(一)PCR技術(shù)的基本原理37
(二)PCR技術(shù)操作要素38
(三)PCR技術(shù)所需儀器設備41
(四)各種PCR技術(shù)的變體42
八、細胞培養(yǎng)技術(shù)42
(一)設施器材及培養(yǎng)基43
(二)細胞培養(yǎng)常規(guī)操作44
(三)細胞培養(yǎng)具體流程44
(四)注意事項46
(五)細胞培養(yǎng)方式47
(六)細胞培養(yǎng)存在的不足47
九、其他常規(guī)儀器設備的使用47
(一)移液器47
(二)酶標儀49
(三)水浴鍋51
第三章實驗項目53
第一節(jié)基礎性實驗項目53
一、蛋白質(zhì)定量分析實驗53
實驗一考馬斯亮藍G-250法測定蛋白質(zhì)含量53
實驗二BCA法測定蛋白質(zhì)含量54
實驗三Folin-酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質(zhì)含量56
實驗四紫外分光光度法測定蛋白質(zhì)含量58
二、層析分離純化實驗59
實驗五血清γ-球蛋白的分離純化與鑒定59
實驗六血清脂質(zhì)的薄層層析62
三、電泳實驗64
實驗七血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳及定量分析64
實驗八心、肝、腎組織乳酸脫氫酶同工酶的電泳分離66
實驗九聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白69
實驗十SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量75
四、酶學實驗78
實驗十一堿性磷酸酶的分離、純化與比活性測定78
實驗十二酶促反應動力學實驗83
實驗十三MMP-2和MMP-9表達的明膠酶譜分析90
五、物質(zhì)代謝實驗92
實驗十四胰島素和腎上腺素對血糖濃度的影響92
實驗十五肝糖原的提取與鑒定97
六、分子生物學實驗99
實驗十六組織細胞基因組DNA的提取99
實驗十七質(zhì)粒DNA的提取、定量、電泳與酶切鑒定101
實驗十八核酸含量的測定105
實驗十九PCR擴增目的基因109
實驗二十DNA瓊脂糖凝膠電泳及限制性內(nèi)切核酸酶酶譜分析112
第二節(jié)融合性實驗項目114
一、免疫生化技術(shù)114
實驗二十一凝集反應114
實驗二十二沉淀反應119
實驗二十三免疫擴散和免疫電泳125
實驗二十四酶聯(lián)免疫吸附實驗131
實驗二十五免疫膠體金實驗135
二、分子生物學、細胞生物學、生物化學整合實驗139
實驗二十六培養(yǎng)細胞或組織總RNA的提取及RT-PCR擴增目的基因139
實驗二十七培養(yǎng)細胞綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染及熒光顯微鏡檢測表達效率146
實驗二十八蛋白質(zhì)印跡(Western blot)實驗150
第三節(jié)創(chuàng)新性實驗項目159
實驗二十九基因克隆與重組表達質(zhì)粒的構(gòu)建159
實驗三十基因重組表達質(zhì)粒在原核細胞中的表達、純化與鑒定164
實驗三十一基因重組表達質(zhì)粒在真核細胞中的表達與檢測168
實驗三十二免疫酶組織(細胞)化學技術(shù)172
實驗三十三免疫熒光細胞化學技術(shù)175
參考文獻178
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