本書按照口腔生物醫(yī)學(xué)研究生課程的實驗法教學(xué)方式的目標(biāo)和要求編寫而成,涵蓋了分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、組織形態(tài)學(xué)、口腔疾病動物模型、口腔微生物學(xué)等研究常用的實驗技術(shù)的實驗原理和方法步驟。本書內(nèi)容不僅包括生物醫(yī)學(xué)研究的通用實驗技術(shù),如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、反轉(zhuǎn)錄實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)、蛋白質(zhì)免疫印跡實驗(Western-hlot)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞免疫熒光實驗、石蠟切片制作染色、冰凍切片制作染色、免疫組織化學(xué)法、流式細(xì)胞術(shù)等;還包括了具有口腔生物醫(yī)學(xué)研究特色的實驗技術(shù),如大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨、人牙根尖乳頭、人牙髓、人牙齦、人牙周膜等各種口腔組織的原代細(xì)胞培養(yǎng)方法,以及離斷下牙槽神經(jīng)、單獨牙周缺損、小鼠上頜快速擴弓、大鼠口腔潰瘍等動物模型的建立方法,并介紹了各種口腔特有的細(xì)菌的培養(yǎng)方法、脫鈣液的配制方法等。本書的所有實驗操作方法都來源于作者本人的真實案例,所以具有很好的可讀性、實用性和可操作性。
第一章 分子生物學(xué)常用實驗技術(shù)
第一節(jié) 聚合酶鏈反應(yīng)
第二節(jié) 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)
第三節(jié) 實時定量聚合酶鏈反應(yīng)
第四節(jié) CRISPR-Cas9載體構(gòu)建
第五節(jié) BCA法測定蛋白質(zhì)濃度
第六節(jié) 冷凍干燥技術(shù)
第七節(jié) 蛋白質(zhì)印跡實驗
第八節(jié) 免疫共沉淀分析
第二章 細(xì)胞生物學(xué)常用實驗技術(shù)
第一節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)的無菌操作技術(shù)
第二節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)基、血清和抗生素
第三節(jié) 常用原代細(xì)胞培養(yǎng)方法
第四節(jié) 貼壁細(xì)胞的傳代、凍存和復(fù)蘇
第五節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)污染表現(xiàn)及其處理方法
第六節(jié) 常用培養(yǎng)細(xì)胞染色方法
第七節(jié) MTT法檢測細(xì)胞活性
第八節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)
第三章 組織形態(tài)學(xué)實驗技術(shù)
第一節(jié) 石蠟切片制作技術(shù)
第二節(jié) 石蠟切片蘇木精伊紅染色法
第三節(jié) 冰凍切片技術(shù)
第四節(jié) 免疫組織化學(xué)染色方法
第五節(jié) 硬組織切磨片技術(shù)
第四章 動物實驗技術(shù)
第一節(jié) 常用實驗動物品種簡介
第二節(jié) 實驗動物麻醉技術(shù)
第三節(jié) 常用動物實驗技術(shù)
第四節(jié) 常用口腔疾病動物模型
第五節(jié) 常用實驗動物的處死方法
第六節(jié) 各種組織器官的取材方法
第五章 微生物實驗技術(shù)
第一節(jié) 口腔生物醫(yī)學(xué)研究常用細(xì)菌簡介
第二節(jié) 常用細(xì)菌培養(yǎng)基配制方法
第三節(jié) 固體或半固體培養(yǎng)基的制作
第四節(jié) 細(xì)菌接種方法
附錄 常用實驗液體配制方法
參考文獻(xiàn)