目錄
叢書序
刖言
緒論 1
一、早期的無囷過濾技術(shù)（19世紀(jì)末） 1
二、早期的病毒培養(yǎng)和觀察（20世紀(jì)初至30年代） 1
三、細(xì)胞培養(yǎng)和疫苗開發(fā)（20世紀(jì)中后期） 2
四、基因工程技術(shù)（20世紀(jì)末） 3
五、新興技術(shù)(21世紀(jì)) 3
六、病毒檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展歷程 4
第一篇 醫(yī)學(xué)病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)
第一章 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全 9
第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全概述 9
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)等級(jí) 11
一、生物安全實(shí)驗(yàn)室 11
二、實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)要求 11
第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理 15
一、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理原則 15
二、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系的組織架構(gòu) 16
三、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理制度體系 16
四、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系運(yùn)行 17
第二章 病毒的檢測(cè)技術(shù) 18
第一節(jié) 病毒的樣本采集 18
一、采集樣本前做好標(biāo)記 20
二、樣本采集時(shí)間 20
三、樣本種類與部位 20
四、樣本處理和保存 20
五、血清學(xué)診斷樣本 20
六、保障生物安全 21
第二節(jié) 病毒的形態(tài)學(xué)檢查 21
一、電子顯微鏡檢測(cè)技術(shù) 21
二、光學(xué)顯微鏡檢測(cè)技術(shù) 22
第三節(jié) 病毒的分離培養(yǎng)與鑒定技術(shù) 22
一、病毒的分離培養(yǎng) 22
二、病毒的鑒定 23
三、病毒的定量測(cè)定 24
第四節(jié) 病毒的分子檢測(cè)技術(shù) 25
一、核酸分子檢測(cè) 25
二、蛋白質(zhì)分子檢測(cè) 27
第五節(jié) 病毒的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù) 28
一、免疫熒光技術(shù) 28
二、酶聯(lián)免疫技術(shù) 28
三、放射免疫測(cè)定技術(shù) 28
四、免疫印跡技術(shù) 29
五、免疫尉斤技術(shù) 29
第二篇 醫(yī)學(xué)病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)案例
第三章 病毒的消毒方法 33
第一節(jié) 攜帶報(bào)告基因的重組復(fù)制缺陷型腺病毒的構(gòu)建 33
一、重組腺病毒載體特征 33
二、重組腺病毒構(gòu)建 35
第二節(jié) 比較不同消毒方法對(duì)重組腺病毒的消毒效果 40
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?0
二二、實(shí)驗(yàn)用品 40
三、實(shí)驗(yàn)方法 40
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 41
第四章 流行性感冒病毒的分離、培養(yǎng)與鑒定 43
第一節(jié) 案例 44
第二節(jié) 樣本采集 44
一、樣本采集的安全防護(hù)措施 44
二、樣本采集的方法 44
第三節(jié) 流感病毒的分離培養(yǎng) 45
一、雞胚尿囊腔接種 45
二、MDCK細(xì)胞分離培養(yǎng) 47
第四節(jié) 流感病毒的鑒定 48
一、血凝試驗(yàn) 48
二、血凝抑制試驗(yàn) 50
三、流感病毒onestep RT-PCR檢測(cè) 51
四、流感病毒real-time one step RT-PCR方法.53
五、流感病毒的基因組測(cè)序 55
第五章 乙型肝炎病毒的檢測(cè)及常用的病毒學(xué)研究方法 57
第一節(jié) 案例 58
第二節(jié) 樣本采集 58
第三節(jié) HBV抗原及抗體檢測(cè) 59
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?59
二、實(shí)驗(yàn)原理 59
三、實(shí)驗(yàn)用品 60
四、實(shí)驗(yàn)方法 61
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 64
第四節(jié) HBV DNA定量檢測(cè) 65
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?65
二、實(shí)驗(yàn)原理 65
三、實(shí)驗(yàn)用品 65
四、實(shí)驗(yàn)方法 66
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 67
第五節(jié) HBV感染肝組織免疫組織化學(xué)分析 68
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?68
二、實(shí)驗(yàn)原理 68
三、實(shí)驗(yàn)用品 68
四、實(shí)驗(yàn)方法 69
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 70
第六節(jié) HBV的其他檢測(cè)方法簡(jiǎn)介 70
一、HBVcccDNA 的檢測(cè) 70
二、血清HBVRNA定量檢測(cè) 71
第六章 人類免疫缺陷病毒的檢測(cè)及常用的病毒學(xué)研究方法 72
第一節(jié) 案例 73
第二節(jié) 樣本采集 73
一、樣本來源 73
二、樣本采集步驟 74
第三節(jié) HIV篩查試驗(yàn)（HIV抗原/抗體檢測(cè)） 76
一、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 77
二、化學(xué)發(fā)光免疫分析或免疫熒光試驗(yàn) 79
三、快速檢測(cè)試驗(yàn) 80
第四節(jié) HIV抗體確證試驗(yàn) 81
一、免疫印跡檢測(cè)HIV抗體 81
二、重組/線性免疫印跡 82
第五節(jié) HIV病毒載量的檢測(cè) 82
一、分支DNA雜交技術(shù)檢測(cè)HIV病毒載量 83
二、核酸序列依賴性擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)HIV病毒載量 84
三、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)HIV病毒載量 85
第六節(jié) HIV中和試驗(yàn) 86
第七節(jié) HIV的其他病毒學(xué)研究方法 88
一、HIV的分離培養(yǎng) 88
二、CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量檢測(cè) 88
三、HIV耐藥性檢測(cè) 89
四、HIV儲(chǔ)存庫的檢測(cè) 89
五、臨床其他檢測(cè)方法 90
第七章 輪狀病毒的檢測(cè)及常用的病毒學(xué)研究方法 91
第一節(jié) 案例 92
一、案例概述 92
二、需要解決的問題 92
第二節(jié) 樣本采集 92
一、采集對(duì)象 92
二、采樣人員基本要求 93
三、樣本采集基本要求 93
四、采集樣本種類 93
第三節(jié) 輪狀病毒核酸檢測(cè) 94
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?94
二、實(shí)驗(yàn)原理 94
三、實(shí)驗(yàn)用品 94
四、實(shí)驗(yàn)方法 95
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 96
第四節(jié) 輪狀病毒的分型方法 97
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?97
二、實(shí)驗(yàn)原理 97
三、實(shí)驗(yàn)用品 97
四、實(shí)驗(yàn)方法 98
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 98
第五節(jié) 輪狀病毒的其他病毒學(xué)研究方法 99
一、電鏡檢測(cè) 99
二、免疫電鏡檢測(cè) 99
三、ELISA檢測(cè) 100
四、膠體金免疫層析試紙條法檢測(cè) 101
五、其他檢測(cè)方法 102
第八章 人乳頭瘤病毒的檢測(cè)及常用的病毒學(xué)研究方法 103
第一節(jié) 案例 103
第二節(jié) 樣本采集 104
一、采集對(duì)象 104
二、釆集方法 104
第三節(jié) 人乳頭瘤病毒的原位雜交實(shí)驗(yàn) 105
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?105
二、實(shí)驗(yàn)原理 105
三、實(shí)驗(yàn)用品 105
四、實(shí)驗(yàn)方法 105
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 106
第四節(jié) 人乳頭瘤病毒的斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn) 107
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?107
二、實(shí)驗(yàn)原理 107
三、實(shí)驗(yàn)用品 107
四、實(shí)驗(yàn)方法 108
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 108
第五節(jié) 人乳頭瘤病毒的分型基因芯片檢測(cè) 108
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?108
二、實(shí)驗(yàn)原理 109
三、實(shí)驗(yàn)用品 109
四、實(shí)驗(yàn)方法 109
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 110
第九章 漢坦病毒的檢測(cè)及常用的病毒學(xué)研究方法 111
第一節(jié) 案例 111
第二節(jié) 樣本采集 111
一、樣本類型 112
二、采樣程序 112
三、注意事項(xiàng) 112
四、其他臨床數(shù)據(jù)采集 112
五、樣本處理 112
第三節(jié) 漢坦病毒抗體的檢測(cè) 112
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?112
二、實(shí)驗(yàn)原理 112
三、實(shí)驗(yàn)用品 113
四、實(shí)驗(yàn)方法 113
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 114
第四節(jié) 漢坦病毒抗原的檢測(cè) 114
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?114
二、實(shí)驗(yàn)原理 114
三、實(shí)驗(yàn)用品 115
四、實(shí)驗(yàn)方法 115
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 116
第五節(jié) 漢坦病毒核酸的檢測(cè) 116
一、實(shí)驗(yàn)酬 116
二、實(shí)驗(yàn)原理 116
三、實(shí)驗(yàn)用品 117
四、實(shí)驗(yàn)方法 117
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 118
第六節(jié) 漢坦病毒的其他病毒學(xué)研究方法 118
第十章 新發(fā)病毒性傳染病病原的分離與鑒定 119
第一節(jié) 案例 120
第二節(jié) 樣本采集 120
一、采集對(duì)象 120
二、采樣人員基本要求 120
三、采集樣本基本要求 120
四、采集樣本種類 121
第三節(jié) 新冠病毒的宏基因組測(cè)序 121
一、實(shí)驗(yàn)酬 122
二、實(shí)驗(yàn)原理 122
三、實(shí)驗(yàn)用品 122
四、實(shí)驗(yàn)方法 122
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 123
第四節(jié) 新冠病毒的分離培養(yǎng) 124
一、實(shí)驗(yàn)酬 124
二、實(shí)驗(yàn)原理 124
三、實(shí)驗(yàn)用品 125
四、實(shí)驗(yàn)方法 125
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 126
第五節(jié) 新冠病毒的核酸檢測(cè) 126
一、實(shí)驗(yàn)酬 126
二、實(shí)驗(yàn)原理 126
三、實(shí)驗(yàn)用品 127
四、實(shí)驗(yàn)方法 127
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 128
第六節(jié) 假病毒中和試驗(yàn) 129
一、實(shí)驗(yàn)酬 129
二、實(shí)驗(yàn)原理 129
三、實(shí)驗(yàn)用品 129
四、實(shí)驗(yàn)方法 130
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分析 131
主要參考文獻(xiàn) 132
縮略詞 136